無菌室空氣質量檢查應按照采樣計劃，根據情況對處于空態、靜態和正常運行的風險區，使用適當的儀器采集空氣中微生物，測定并監控風險區空氣的微生物污染。空氣懸浮微生物的采樣和計數方法多種多樣，根據不同采樣目的決定具體的采樣方法和采樣器。因采樣器的采集效率不同，應慎重選擇合適的方法和設備。采樣器分為兩類：被動式采樣器，如落菌盤；主動式采樣器，如過濾采樣器、撞擊采樣器、沖擊采樣器等。

1、沉降法

落菌盤等被動式空氣微生物采樣器不能測量空氣中的微生物的總數，而是測量空氣中微生物在表面的沉降率。只要確定單位時間落菌盤上微生物的數量，再根據落菌盤的暴露面積與暴露時間之間的關系，即可大致計算出空氣中微生物的數量。

面積小于30m2的室內設一條對角線取3點，在其中心以及兩端距墻1m處各取1點；面積大于30m2的室內房間四面距墻1m和中央各放置一個平皿，高度為實驗臺高度。培養基平皿開蓋暴露10min，然后蓋上蓋子倒放，培養48h，計數每個平皿上的菌落數。

日常監控時，可以設定可接受的菌落數限值。一般無菌室所有的取樣平皿上的細菌總數應小于15個。空氣質量良好的無菌室，通常每個平皿上生長的細菌不超過2個菌落數。

2、空氣過濾法

空氣采樣除了自然沉降法外，還可以使用專門的主動式采樣器。主動式采樣器可以評估風險區空氣微生物的特征。主動式采樣器主要包括過濾采樣器、撞擊采樣器、沖擊采樣器等。

撞擊采樣器可以分為狹縫式采樣器、離心式采樣器和針孔式采樣器。狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉的平板培養基表面上，附著的活微生物粒子經過培養后形成菌落，予以計數。離心式采樣器由于內部風機的高速旋轉，氣流從采樣器前部吸入從后部流出，在離心機的作用下，空氣中的活微生物粒子有足夠的時間撞擊到專用的固形培養條上，經培養后形成菌落，予以計數。

過濾式空氣采樣器是最常用、最簡單的空氣采樣器。過濾式采樣器有采樣頭、濾器、流量計和抽氣泵組成。過濾式采樣器的結構如圖：

開動電機后，抽氣泵工作，帶動空氣吸入采樣頭，空氣通過濾器的時候，大于濾膜孔徑的顆粒被阻留，當達到預先設定吸氣體積后抽氣泵停止工作，將濾膜取出轉貼到培養基上，培養后計算空氣中微生物的濃度。過濾式采樣器捕獲效率高，但是濾膜材料可能影響微生物的存活率，還有采樣阻力大、流量易變的缺陷。

在沒有空氣采樣器的情況下，可以自己組裝如下圖的空氣錯率采樣裝置，注意組裝連接處必須密不透風。

打開圖中大瓶的龍頭，空氣就被抽入無菌水中。待4L水流完，就有4L空氣通過小瓶中的無菌水，也就是4L空氣中的微生物被留存在50mL無菌水中。無菌吸取1mL過濾的水樣進行平板計數，做2個平行。37℃培養48h計數。

每升空氣中的細菌數為：2個平皿上細菌數量的平均值×50/4。